期刊简介
本刊系中华预防医学系列杂志，中国科技核心期刊。内容包括：论著、实验技术与方法、调查研究、综述、CAC和SPS等国际专栏以及食品安全的法律、法规、政府公告、文件和批示。内容涉及食品安全“从农田到餐桌”的全过程，是我国的食品安全专业期刊。
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首页>中国食品卫生杂志
- 杂志名称：中国食品卫生杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会；中国卫生信息与健康医疗大数据学会
- 国际刊号：1004-8456
- 国内刊号：11-3156/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：2003～2004年度 中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖 2005～2006年度 中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖期刊收录：维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
基于内参的副溶血性弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立
王建昌；王金凤；李静；孙晓霞；陈瑞春
关键词：副溶血性弧菌, gyrB, 实时荧光定量PCR, IAC, 食源性致病菌, 食品安全
摘要：目的 建立基于内参的副溶血性弧菌实时荧光定量PCR方法,快速检测样品中的副溶血性弧菌.方法 根据GenBank已公布的副溶血性弧菌基因组序列,筛选特异性靶基因,设计特异性引物探针,优化反应体系,并在体系中加入内参(IAC),通过标记不同荧光基团的TaqMan探针来监测IAC,进而实时监控整个PCR反应.按照5～50 cfu/25 g的细菌量人工污染样品,以评价所建立反应的体系.结果 以副溶血性弧菌基因组DNA为模板,低检测限为l pg/μl;以10倍梯度稀释的菌液经水煮法提取的DNA为模板,低检测限为4×102 cfu/ml;以舍有gyrB的质粒为模板,低检测极限可以达到100 copies/μl;建立gyrB和gyrB-IAC标准曲线,Ct值与模板拷贝数均呈良好线性关系(r2=0.999);人工污染初始菌量为7 cfu/25 g时,样品中副溶血性弧菌增菌6h即可检出.结论 本研究所建立的gyrB-IAC实时荧光定量PCR方法,既能有效检测食品中副溶血性孤菌,又能实时监测PCR反应过程,有效防止“假阴性”的发生,结果可靠,有利于实现海产品中副溶血性孤菌实时荧光定量PCR检测方法的标准化.
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